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PV ALBEITAR 40/2014    
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Nuevo kit de Vacunek para la detección del virus gripal A/H1N1

Vacunek

Última actualización 03/09/2012@15:48:16 GMT+1

La rápida expansión del virus de la gripe A/H1N1 por todo el mundo y el aumento de casos previsto en el hemisferio norte para este otoño-invierno, hacen necesaria una prueba diagnóstica rápida y lo más económica posible para su detección.

Sánchez I., González N., Lázaro B., Bastida F. VACUNEK. Parque Tecnológico de Bizkaia. Ibaizabal bidea 800-2º. 48160 Derio (Bizkaia, España).

Vacunek ha desarrollado un kit para la detección del virus gripal A/H1N1 de la nueva pandemia basado en técnicas de biología molecular (PCR – reacción en cadena de la polimerasa). El virus gripal A/H1N1 es un nuevo virus influenza de la familia Orthomyxoviridae que fue detectado por primera vez en abril de 2009 en humanos en México y fue popularmente denominado “gripe porcina”’.
Otros muchos países, incluyendo Estados Unidos, Canadá, y España también han confirmado casos de esta enfermedad en humanos. En Europa, el mayor número de casos reportados hace referencia al Reino Unido y Alemania, habiendo sido confirmados en el laboratorio decenas de miles de casos de infección por este virus A/H1N1. En junio 2009 la Organización Mundial de Salud (OMS) clasificó de pandemia (nivel 6) la infección por el nuevo virus de la gripe.



A pesar de contener información genética del virus de la gripe porcina, la presencia del nuevo virus A/H1N1 en cerdos sólo ha sido confirmada en casos puntuales y en todos se sospecha que fue una trasmisión de humanos a cerdos. De todas formas, expertos en este campo señalan que con el tiempo este virus se propagará naturalmente en explotaciones de cerdos y, por ello, la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE) recomienda a los servicios veterinarios y a los productores de porcino mantenerse en máxima alerta sanitaria y contar con técnicas de diagnóstico rápidas y específicas.
El nuevo kit de Vacunek basado en la técnica de la PCR es altamente sensible además de rápido al ser un proceso bioquímico muy específico. Con esta técnica se detecta el agente infeccioso sin que sea necesario cultivar el microorganismo en el laboratorio, y el resultado del ensayo puede conocerse en menos de dos horas. Además, la técnica de PCR puede ser complementaria a ensayos basados en anticuerpos.

¿Qué es un ensayo de PCR?
En líneas generales la PCR consiste en la detección específica de secuencias de nucleótidos y está basada en una amplificación exponencial, por medio de enzimas, de una secuencia de ADN determinada. Si el virus a identificar tiene como información genética ARN en vez de ADN, se añade un paso inicial con una retrotranscriptasa.



Existen varios métodos para realizar una PCR y medir los resultados del ensayo, siendo la PCR a tiempo real la técnica más reciente y que más ventajas ofrecería a un laboratorio de diagnóstico debido a su alta especificidad, sensibilidad, rapidez, sencillez, reducción de contaminación entre muestras del ensayo, cuantificación y la posibilidad, incluso, de detectar más de un patógeno en el mismo ensayo. Esta es la técnica de referencia para la detección molecular del virus influenza.

Kit de detección de Vacunek
El kit de Vacunek incluye 3 reactivos (Master Mixes), uno para la detección del virus influenza tipo A, un segundo para la confirmación del subtipo H1 del nuevo virus A/H1N1 y finalmente otro reactivo para la confirmación del subtipo de virus porcinos H1N1 de cepas Europeas y Asiáticas. La confirmación de los subtipos puede realizarse también de forma simultánea. Cada Master Mix proporciona un control interno positivo que permite detectar falsos negativos debidos a una inhibición de la PCR. Además, contiene un fluorocromo pasivo de referencia, que permite realizar una normalización pasiva de la señal evitando posibles errores en la cuantificación debidos a diferencias de pipeteo. 
La gran ventaja competitiva del kit de Vacunek es la capacidad de diferenciar entre la cepa del virus de la nueva gripe A/H1N1 y las cepas H1N1 que circulan actualmente en explotaciones de cerdos en Europa y Asia (figura 1). Este kit contribuye a aumentar la capacidad de testar la presencia de este nuevo virus en un número alto de muestras, posibilitando la confirmación del número de casos reportados y ofreciendo una visión más precisa de la situación de la enfermedad en nuestro país.

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